發(fā)布時(shí)間: 2022-07-21 點(diǎn)擊次數(shù): 689次
NIBSC89/548介白素6采用的是雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定樣品中人白細(xì)胞介素-6(IL-6)的水平。向預(yù)先包被了人白細(xì)胞介素-6(IL-6)單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入白細(xì)胞介素-6(IL-6),溫育;洗滌后,加入HRP標(biāo)記過(guò)的白細(xì)胞介素-6(IL-6)抗體。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶,然后加入底物A、B,產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺與樣品中人白細(xì)胞介素-6(IL-6)的濃度呈正相關(guān)。
NIBSC89/548介白素6注意事項(xiàng):
1.從2-8℃取出的試劑盒,在開(kāi)啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差
3.建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測(cè)。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再按說(shuō)明書(shū)操作進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
4.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
5.為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。
6.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7.底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
NIBSC89/548介白素6手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。